產品簡介

組織樣本細胞核/胞漿分離試劑盒可以從各種動物實體組織如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等組織樣本中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉錄活性，RNA拼接，gel－shift 分析，報告分析，酶活性分析和 WB 等。

產品組成：

規格  50T  100T

提取液 A 25ml  50ml

核保存液 B  10ml  20ml

蛋白酶抑制劑混合物  100ul  200ul

儲存條件：

試劑 A 和 B 2-8℃保存；

蛋白酶抑制劑-20℃保存。

試劑盒以外自備試劑和儀器

● 移液器、吸頭

● 離心機及離心管

● 渦旋振蕩器

● 冰箱，冰盒

● 勻漿機/勻漿器

● 振蕩器

● 0.01M PBS緩沖液

有效期：一年。

注意事項：

● 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

● 本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

● 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

● 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。

● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用方法：

使用注意事項：

*旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

*實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

*蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

*可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

1. 取 50mg-100mg 組織樣本用PBS洗干凈，用剪刀盡可能剪碎，加入500ul冷的試劑A，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體（或用液氮研磨）。

2、將勻漿液置 2-8°C條件下振蕩 20-30 分鐘，

【注】

①用振蕩器/搖床的較低轉速，保持液體有輕微晃動即可。

②沒有振蕩條件的話，也可冰上靜置，稍微延長處理時間，中間每隔5 分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。

③組織樣本量根據實驗情況調整，每次的提取液用量并不是一定的，大約為組織體積的 5-10倍即可，請根據實際情況調整。

④可以根據自己實驗需要在每 500ul 提取液A 中加入2ul 蛋白酶抑制劑。

3、在 4°C，1200xg 條件下離心5分鐘。

4、將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到胞漿組分，請置冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

5、沉淀用 PBS 洗滌一次，在4°C，2000xg 條件下離心15分鐘，棄上清。

6、沉淀為細胞核組分，將沉淀直接用于下游實驗或用200ul 保存液B 重懸后保存各用。