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產(chǎn)品名稱 :	PH0505 \| 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液胰酶細(xì)胞消化液（1×）/ 0.25%Trypsin-EDTA Solution（1×）
產(chǎn)品品牌 :	飛凈 PHYGENE

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

胰蛋白酶（Trypsin）簡(jiǎn)稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細(xì)胞的提取、培養(yǎng)，以及體外細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，均會(huì)使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細(xì)胞間蛋白質(zhì)，使組織或細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶在37℃ pH 8.0條件下消化能力最強(qiáng)。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細(xì)胞間連接蛋白的水解，起到增強(qiáng)消化的效果。酚紅是一種pH指示劑，溶液偏堿性時(shí)呈紫紅色，偏酸性時(shí)呈橘紅色，近中性時(shí)呈粉紅色。

存儲(chǔ) 冰袋運(yùn)輸，-20℃保存，有效期18個(gè)月，建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融。

操作說(shuō)明

貼壁細(xì)胞的消化：

1、吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的pbs、hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清.

2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同.

3個(gè)、顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化，或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)；此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液；加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn).

4、如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。

5個(gè)、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000G離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

組織的消化：

不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項(xiàng)

1. 由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況，確定最佳消化時(shí)間；消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況。

2. 本產(chǎn)品不含抑菌劑，在使用過(guò)程中要特別注意無(wú)菌操作，避免消化液被微生物污染。

3. 如含有酚紅指示劑的消化液，可能會(huì)因某些原因?qū)е聀H略微下降，從而導(dǎo)致溶液顏色由紅色變成橙色。該種橙色的溶液依然可以使用，或者也可采用無(wú)菌的2M NaOH溶液對(duì)pH進(jìn)行微調(diào)后使用。

4. 本產(chǎn)品不宜4℃長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融，建議分裝成小份后-20℃保存。

5. 對(duì)于胰酶中EDTA、酚紅的選擇，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，對(duì)于一般的腫瘤細(xì)胞，選擇含EDTA的胰酶消化液。對(duì)于較敏感、脆弱的細(xì)胞，例如原代細(xì)胞及很容易消化的細(xì)胞，選擇不含EDTA的胰酶消化液，如果細(xì)胞特別敏感，需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液。如果需要用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，則選用不含EDTA的胰酶消化液。

6. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

溫馨提示：1.本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。2.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果可由多種因素影響，相關(guān)處理只限于產(chǎn)品本身，不涉及其他賠償。

對(duì)自己使用過(guò)的商品進(jìn)行評(píng)價(jià)，它將成為大家購(gòu)買參考依據(jù)。

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